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孔雀石绿（MG）在许多国家禁用（北美和欧洲等），是一种常用的杀菌剂，可用作治疗鱼类、贝类或鱼卵的寄生虫、真菌或细菌感染。隐形孔雀石绿（LMG）是孔雀石绿的代谢物，在鱼组织中储存时间长于孔雀石绿。如果检测出孔雀石绿或隐性孔雀石绿，监管部门会采取相应措施，可能会被召回。阳性结果需要用GC，HPLC等方法验证。
Evergreen孔雀石绿/隐性孔雀石绿酶联免疫检测试剂盒检测采用竞争性酶联免疫原理检测样品中的孔雀石绿。发现的残留主要是组织中减少的隐性孔雀石绿，试剂盒主要检测孔雀石绿，因此需要一步氧化过程，把隐性孔雀石绿转化为孔雀石绿（试剂盒提供所有试剂）。使用提取溶液混合或振荡样品，提取孔雀石绿或隐性孔雀石绿，使用氧化试剂（试剂盒中提供）氧化样品。检测时，向微孔中加入标准液或稀释/氧化的样品溶液、再加入孔雀石绿抗体开始反应。孵育30分钟后，洗涤微孔。然后加入HRP酶标记物，孵育30分钟，再次洗涤。然后向微孔中加入澄清TMB显色溶液，与HRP酶标记物结合产生蓝色。孵育20-30分钟后，终止反应，读取每个微孔颜色。将未知样品的吸光值与标准品的吸光值相比，即可得到样品中孔雀石绿/隐性孔雀石绿的浓度。
孔雀石绿检测试剂盒